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鹿血的科学鉴别方法

2010-04-18 18:19 来源:互联网 发布人: 浏览:

    依据法医学血清学抗体沉淀反应的理论,使用抗鹿 Hb(血红蛋白)血清为抗体,快速准确地鉴别了鹿血干粉,为这种名贵中药的原料质量控制提供了一种新型准确稳定的方法。

    1、实验与方法

    1.1 抗鹿Hb血清的制备

    抗原:无菌操作下来鹿血液若干毫升,装人加有适量抗凝剂的容器中,冰箱保存。取出以生理盐水离心洗去血浆成分,取出若干毫升,加入灭菌冷蒸馏水洗制成20-40%的鹿血Hb溶液,除去基质后,加等量高渗盐水,再加入等量不完全福氏佐剂乳化供免疫注射使用。免疫注射:用健康家兔为试验对象。

    以家兔大腿胭窝印肌肉背部皮下为注射本。间隔6日每次4-7ml,各注射一次,历时18天,心脏穿刺取血初试满意后,以免颈A吊线放血法全采血分离血清。 效价及特异性测定:以事先准备好的鹿血HbV1/1000,1/2000,1/5000,1/10000,1/30Q0分别测定 l-5号抗鹿 Hb血清的效效价,结果各号抗鹿 Hb血清效价均高于1/1000,、最高 5号达到1/30000倍,并以其它猪、牛、羊动物血色素l/1000作沉淀试剂,结果均呈阴性反应,说明抗鹿Hb血清特异性良好。

    1.2 应用抗鹿Hb血清定性鉴别鹿血干粉 鹿血干粉来源于辽宁远东药业集团,样品标号l~5# ,五个样品外观均为暗紫色干血粉。 血样提取及处理:取1~5#血样各0.1g,分别装入试管中,加人适量生理盐水,充分搅拌,经数小时浸泡后,离心取血清液,测其浓度、以千倍稀释液作如下试验。 沉淀试验:把1~5#血样1/1000稀释液分别用毛细管壁缓缓注入预先装有半量抗鹿Hb血清的微型沉淀管内,室温下日光观察,沉淀反应结果表明;血样1,2,3,4,5#微型沉淀管内二液交界面上,15分钟后出现白色沉淀环,此为抗鹿阳性反应。血样3#,经60分钟呈抗阴性反应,后经抗猪 Hb血清测定,鉴定为猪血。即 1,2,4,5 #血样为鹿血。

    2、结果与讨论

    本文应用不完全佐剂加抗原做家兔胭部肌肉及背部皮下注射六日间隔三次,仅十八天便制成了高效价特异性良好的抗鹿Hb血清,该免疫方法快速准确。 应用抗腐血清Hb可方便准确地鉴定鹿血干粉的真伪,为这种名贵中药材的鉴别及药材收购的质量控制提供了一个良好的鉴定方法,与此同时,也可为其他动物制品的种属鉴别提供一个可靠的经验。